Reagenti per ELISA a base di nanoparticelle
Applicazione: ELISA
L'ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) è una tecnica analitica in cui uno dei componenti della reazione è adsorbito al fondo di un pozzetto di una micropiastra per facilitare la separazione tra i reattivi a lui legati e quelli liberi. Nelle analisi più comunemente effettuate, il campione contenente l'antigene che deve essere rilevato è aggiunto al pozzetto e lasciato legare all'anticorpo legato al fondo del pozzetto stesso. Dopo i lavaggi, un anticorpo secondario marcato con un enzima è aggiunto per formare un "sandwich" con anticorpo legato alla piastra - antigene - anticorpo legato all'enzima. Il reagente non legato è lavato via e viene poi aggiunto il substrato dell'enzima. Il quantitativo del prodotto generato dalla reazione enzimatica è proporzionale alla quantità di antigene presente nel campione ed è rilevata utilizzando appositi strumenti (solitamente lettori di piastra in assorbimento). In alternativa, il saggio consente la rilevazione della presenza id un anticorpo specifico all'interno di un campione utilizzando piastre che hanno legato sul fondo l'antigene di interesse. In questo caso il reagente secondario coniugato all'enzima che viene impiegato è specifico per l'anticorpo da rilevare. Le fasi succesive sono le stesse descritte in precedenza.
Stato dell'arte
Anche se il saggio ELISA è una metodica di lungo corso ampiamente utilizzata nei laboratori di tutto il mondo. non è esente da frequenti inconvenienti che spesso portano a perdite di tempo e denaro a causa della necessità di ripetere la seduta sperimentale. Questi problemi sono dovuti soprattutto dalla risaputa instabilità dell'anticorpo utilizzato per la rilevazione che può degradarsi o precipitare. La degradazione e la precipitazione portano entrambe un calo nel titolo anticorpale. Questo problema può essere aggirato, in urgenza, procedendo ad una nuova titolazione del reagente che, però, non è esente dal causare ritardi e costi aggiuntivi. Inoltre, la scarsa quantità di enzima coniugato per anticorpo secondario può portare a risultati falsi negativi, specialmente nei casi in cui l'antigene è scarsamente presente nel campione.
La soluzione AcZon
AcZon ha risolto definitivamente questi problemi applicando la propria pluriennale esperienza nell'ambito delle purificazioni e bioconiugazioni per ottenere un'elevata qualità dell'anticorpo secondario policlonale impiegato per la detection. Inoltre, l'utilizzo delle nanoparticelle fluorescenti AcZon in NanoLISA & NanoLISA-F consente la coniugazione di un numero maggiore di enzimi per anticorpo assicurando una reazione colorimetrica più intensa e la possibilità di sfruttare la fluorescenza intrinseca delle nanoparticelle per un'altra tipologia di rilevazione.
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